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Détermination de la sensibilité des bactéries aux antibiotiques. Méthode de dilution en série. Sources de propagation de souches résistantes de bactéries


Certains agents pathogènes maladies infectieuses  Au fil du temps, la découverte d'antibiotiques n'a guère modifié la nature de la sensibilité initiale à ces médicaments (streptocoques du groupe A, pneumocoques, méningocoques, Brucella, certaines salmonelles).

Cependant, la plupart des microbes pathogènes ont finalement acquis une résistance aux agents antimicrobiens largement utilisés, parfois non contrôlés, et déraisonnables. Le problème de la stabilité des micro-organismes est de la plus haute importance pour les staphylocoques, les shigelles, Escherichia, Protea, parmi lesquels des souches résistantes aux antibiotiques se distinguent le plus fréquemment.

Les méthodes de dilution en bouillon et de diffusion sur disque sont les méthodes de culture bactérienne et de test de sensibilité aux antibiotiques les plus couramment utilisées en médecine vétérinaire. Les deux méthodes peuvent être utilisées pour identifier l'agent pathogène probablement impliqué dans une infection bactérienne et l'antibiotique inhibant probablement la bactérie.

Ames: communiqué de presse de l'Iowa State University. Objectif: référentiel antimicrobien pour un traitement efficace. 2e éd. Faites et ne faites pas de traitement antimicrobien. Hazen, Ph.D., professeur de pathologie et directeur de la microbiologie clinique, Système de santé de l'Université Duke.

Selon le degré de sensibilité aux principaux antibiotiques, les microbes sont divisés en sensibles, modérément sensibles et résistants. Le groupe sensible comprend la majorité des souches de micro-organismes, dont la croissance sur un milieu nutritif est arrêtée lorsqu’on utilise des concentrations correspondant aux doses thérapeutiques moyennes d’antibiotiques. S'il est inhibé en n'utilisant que des doses maximales de médicaments, ces micro-organismes sont modérément sensibles à l'antibiotique. Si, au laboratoire, l'inhibition de la croissance n'est atteinte qu'à des concentrations très élevées du médicament qui ne peuvent pas être créées dans l'organisme, ces agents infectieux résistent à l'antibiotique.

Les tests de sensibilité déterminent la sensibilité d'un agent infectieux aux antimicrobiens en exposant des concentrations normalisées d'agents pathogènes à des concentrations spécifiques d'agents antimicrobiens. Des tests de sensibilité peuvent être effectués sur des bactéries, des champignons et des virus. Pour certains organismes, les résultats des tests peuvent être transmis d'un antibiotique à un autre, de sorte que toutes les substances potentiellement utiles ne sont pas contrôlées.

Pour ces raisons, les résultats des tests de sensibilité ne permettent pas toujours de conclure au succès thérapeutique. Les tests de sensibilité peuvent être effectués de manière qualitative, semi-quantitative ou à l'aide de méthodes biologiques moléculaires. L'effet des combinaisons d'antibiotiques peut être déterminé par des tests synergiques.

Pour déterminer la sensibilité des microbes aux antibiotiques, il existe plusieurs méthodes: la méthode des dilutions en série dans un milieu nutritif liquide ou une gélose nutritive, la méthode de diffusion dans de la gélose (la méthode des disques saturés d'antibiotiques) et des méthodes accélérées. La méthode des disques est simple, largement utilisée, mais ne donne qu’une réponse qualitative. Une méthode quantitative plus fiable et plus précise est la méthode de dilutions en série d'antibiotiques dans un milieu nutritif dans des conditions expérimentales standard. Dans la plupart des cas, la corrélation des données recherche en laboratoire  sur le plan clinique, il est assez complet et la thérapie est efficace pour étudier la dynamique non seulement de l'évolution clinique du processus, mais également d'un éventuel changement de l'agent pathogène ou de sa sensibilité aux antibiotiques.

Les méthodes qualitatives ne sont pas aussi précises que semi-quantitatives. Les résultats sont généralement donnés comme l'un des suivants. Certaines souches ne répondant pas aux critères de résistance ne peuvent être répertoriées que comme sensibles ou immunitaires. La méthode de diffusion d'agar largement utilisée peut être utilisée pour les microorganismes à croissance rapide. Ici, les plaquettes saturées en antibiotiques sont placées sur un milieu d'agar inoculé avec l'agent pathogène à tester. Après l’incubation, mesurez le diamètre de la zone d’inhibition autour de chaque plaquette.

Il est également possible de déterminer la concentration bactéricide minimale, mais il s’agit là d’une technologie exigeante et de normes d’interprétation non encore convenues. L'antibiotique peut être dissous dans de la gélose ou du bouillon, qui est ensuite inoculé avec un agent pathogène. La méthode de dilution en bouillon est la méthode de référence mais prend du temps, car vous ne pouvez tester qu’une seule concentration d’antibiotiques par tube. Plus que méthode efficace utilise une bande de polyester imprégnée d'un gradient de concentration sur toute sa longueur.

La concentration d'antibiotiques dans les tissus et les fluides corporels, ainsi que leur activité antimicrobienne, sont parmi les principaux paramètres déterminant l'efficacité du traitement antibiotique. Lors de son étude, les méthodes de recherche microbiologiques sont les plus largement utilisées, basées sur la capacité d’un antibiotique à retarder la croissance d’un microbe de test.

Ces méthodes incluent des méthodes de biologie moléculaire similaires aux méthodes d'identification d'agents pathogènes, mais modifiées pour détecter des gènes ou des mutations résistants connus. De plus, étant donné que de nouvelles mutations ou d'autres gènes de résistance peuvent être présents, leur absence ne garantit pas la sensibilité aux antibiotiques. Pour ces raisons, et parce que ces tests sont numériquement limités, coûteux et peu répandus, les méthodes à l'acide nucléique ne pourraient remplacer les cultures et les tests de sensibilité classiques.

Un antibiogramme - procédure d'examen spéciale dans le contexte de la microbiologie médicale - est un test de laboratoire destiné à déterminer la sensibilité ou la résistance des agents pathogènes microbiens aux antibiotiques, à administrer avant chaque traitement antibactérien.

Pour déterminer la sensibilité des bactéries aux antibiotiques (antibiogramme), on utilise habituellement:

Méthode de diffusion de gélose . Sur le milieu nutritif en gélose, ensemencez le microbe étudié et fabriquez ensuite des antibiotiques. Habituellement, les préparations sont appliquées soit sur des puits spéciaux en gélose, soit à la surface du semis, où sont disposés des disques contenant des antibiotiques (la «méthode du disque»). Les résultats sont enregistrés tous les deux jours en fonction de la présence ou non de croissance microbienne autour des trous (disques).

Antibiogramme avec différentes méthodes

Un antibiogramme est créé après la culture bactérienne. Dans une culture, les bactéries se multiplient par culture, puis l'efficacité de différentes classes d'antibiotiques est testée contre les bactéries concernées. Il existe différentes méthodes pour créer des antibiogrammes, par exemple.

Pour les antibiotiques nouvellement introduits, les recommandations relatives à l'évaluation des fabricants de substances sont également utilisées s'il existe suffisamment de données publiées et si leur préparation a été déterminée et utilisée à l'aide de méthodes appropriées. Un antibiogramme commence généralement par un échantillon prélevé sur un patient présentant une hémoculture et un frottis. Après l'incubation ultérieure et la croissance des colonies en laboratoire, la première analyse est la classification dite de Gram et la classification morphologique microscopique chez le cocci et le poulet. Avec certains détails du patient - tels que l'âge, la nature de l'infection, son traitement, etc. Il peut généralement être traité comme un agent pathogène spécifique avant l'identification finale.

La méthode du disque est qualitative et permet d’évaluer si le microbe est sensible ou résistant à la préparation.

Des méthodes pour déterminer les concentrations minimales inhibitrices et bactéricides, c'est-à-dire le niveau minimum de l'antibiotique, qui permettent in vitro d'empêcher la croissance visible de microbes dans le milieu nutritif ou de le stériliser complètement. Ce sont des méthodes quantitatives qui vous permettent de calculer la dose du médicament, car la concentration de l'antibiotique dans le sang doit être nettement supérieure à la concentration minimale inhibitrice de l'agent infectieux. L’introduction de doses adéquates du médicament est nécessaire pour traitement efficace  et prévention de la formation de microbes résistants.

En plus de l'agent pathogène responsable, la deuxième information intéressante est quel antibiotique agit contre le germe infectieux détecté ou s'il existe une résistance. Toutefois, ce test dit d'ascenseur diffus n'est pas encore suffisamment normalisé en ce qui concerne les valeurs limites et les substances actives à tester pour un embryon particulier. Souvent, ils n’étudient pas quels autres antibiotiques peuvent être assimilés aux effets de l’antibiotique testé sur un véritable germe.

Mais c'est important à plusieurs égards. Les différences de prix avec un équivalent, mais non prouvé, antibiotique ou testé, ne sont pas répertoriées ou non en stock, il existe déjà des alternatives. Le problème avec un antibiogramme est que le test d'inhibition aux antibiotiques dure 2 à 3 jours. Cette période doit être couverte avant le début du traitement antibiotique ciblé. Cependant, en raison de l’augmentation de la résistance, il est important d’examiner chaque utilisation d’antibiotiques de manière critique.

Il existe des moyens accélérés en utilisant des analyseurs automatiques.

Détermination de la sensibilité des bactéries aux antibiotiques par la méthode des disques.La culture bactérienne étudiée est ensemencée avec une pelouse sur de la gélose nutritive ou du milieu AGV dans une boîte de Pétri.

AGV moyen: bouillon de poisson nutritif sec, agar-agar, phosphate de sodium disubstitué. Le support est préparé à partir de poudre sèche conformément aux instructions.

L'étude de la sensibilité des antibiotiques aux agents pathogènes est la tâche principale du laboratoire de diagnostic microbiologique. Le but est de déterminer aussi précisément que possible ce qui renseigne sur les antibiotiques susceptibles de réussir en thérapie.

Une sélection d'antibiotiques éprouvés sera adaptée aux substances utilisées par la plupart des clients. Nous refusons de spécifier les marques. Vous les trouverez dans le Swiss Medical Compendium. Également aux chapitres 6 et 3. Le matériel de départ pour les tests de résistance est constitué de cultures pures d'agents pathogènes isolés à partir d'échantillons de patients ou envoyés par des laboratoires externes. Deux méthodes sont principalement utilisées pour déterminer la sensibilité aux antibiotiques de l'agent pathogène.

Sur la surface ensemencée avec des pincettes placées à la même distance les unes des autres, des disques en papier contenant des doses spécifiques d'antibiotiques différents. Les cultures sont incubées à 37 ° C jusqu'au lendemain. Le diamètre des zones d'inhibition de la croissance de la culture de bactéries étudiée est jugé sur sa sensibilité aux antibiotiques.

Pour obtenir des résultats fiables, il est nécessaire d’utiliser des disques et des milieux nutritifs standard permettant de contrôler les souches de référence des microorganismes correspondants. La méthode du disque ne fournit pas de données fiables pour déterminer la sensibilité des microorganismes aux antibiotiques polypeptidiques faiblement diffusants dans la gélose (par exemple, la polymyxine, la ristomycine). Si ces antibiotiques sont supposés être utilisés pour le traitement, il est recommandé de déterminer la sensibilité des micro-organismes par la méthode de la dilution en série.

Méthode de diffusion sur disque. Les feuilles contenant des antibiotiques sont placées sur une plaque de gélose préinoculée avec une souche bactérienne testée. L'antibiotique diffuse radialement dans la gélose, formant un gradient de concentration circulaire. Au cours de l'incubation, les bactéries se développent dans le «gazon» et des zones circulaires se forment autour des échelles d'antibiotiques en fonction de leur sensibilité aux antibiotiques. Les avantages de la méthode de diffusion sur disque sont sa flexibilité dans le choix des antibiotiques, ainsi que la possibilité d'obtenir des informations supplémentaires en plus des zones d'inhibition.

Détermination de la sensibilité des bactéries aux antibiotiques par la méthode de dilution en série.Cette méthode détermine la concentration minimale de l'antibiotique qui inhibe la croissance de la culture bactérienne à l'étude. Commencez par préparer une solution basique contenant une certaine concentration de l’antibiotique (µg / ml ou U / ml) dans un solvant spécial ou une solution tampon. Toutes les dilutions ultérieures dans un bouillon (dans un volume de 1 ml) sont préparées à partir de ce mélange, après quoi 0,1 ml de la suspension bactérienne étudiée contenant 10 6-10 7 cellules bactériennes dans 1 ml est ajouté à chaque dilution. Dans le dernier tube, préparer 1 ml de bouillon et 0,1 ml d'une suspension de bactéries (culture témoin). Les cultures sont incubées à 37 ° C jusqu'au lendemain, après quoi les résultats de l'expérience sur la turbidité du milieu nutritif sont notés par rapport à la culture témoin. Le dernier tube avec un milieu nutritif transparent indique une inhibition de la croissance de la culture bactérienne étudiée, sous l’influence de la concentration minimale inhibitrice (CMI) de l’antibiotique qu’il contient.

Concentrations minimales inhibitrices. La concentration minimale inhibitrice décrit la sensibilité aux antibiotiques en unités de concentration milligramme d'antibiotique par litre. Cela permet une comparaison directe avec les concentrations sériques réalisables de la substance active correspondante. La concentration minimale inhibitrice est la plus faible concentration de l'antibiotique à laquelle la croissance d'agents pathogènes ne peut pas être détectée.

Les exceptions sont les agents pathogènes isolés des hémocultures, qui sont contenus pendant trois mois. Interprétation des tests de résistance. Pour la classification, les recommandations les plus récentes du Comité européen sur les tests de sensibilité aux antimicrobiens sont généralement utilisées. On utilise par exemple des substances de marquage détectant de manière très sensible les mécanismes de résistance pouvant conduire à un échec du traitement.

L'évaluation des résultats de la détermination de la sensibilité des microorganismes aux antibiotiques est effectuée sur un tableau prêt à l'emploi contenant les valeurs limites des diamètres des zones d'inhibition de la croissance pour les souches résistantes, moyennement résistantes et sensibles, ainsi que les valeurs de MIC des antibiotiques pour les souches résistantes et sensibles.

De plus, le résultat d'une substance donnée n'est généralement pas limité à elle-même, mais s'étend à toute une classe d'antibiotiques pour lesquels la substance à tester a été choisie pour être représentative. Lors de l'interprétation des données, il est nécessaire de prendre en compte que les résultats peuvent varier en fonction de la variabilité technique et biologique, par exemple. Dans le cas du test de sensibilité aux antibiotiques de la même souche d'agent pathogène à partir d'échantillons de patients différents, cette variabilité peut conduire à des interprétations détournées dans l'antibiogramme.

Les souches microbiennes sensibles, dont la croissance est inhibée aux concentrations de médicament trouvées dans le sérum du patient à l’aide de doses classiques d’antibiotiques. Les souches modérément résistantes sont celles qui inhibent la croissance, ce qui nécessite des concentrations créées dans le sérum sanguin lors de l'administration des doses maximales du médicament. Les micro-organismes sont résistants, dont la croissance n'est pas inhibée par les substances créées dans le corps aux doses maximales autorisées.

Détermination des mécanismes de résistance spéciaux. Certains mécanismes de résistance, notamment ceux qui entraînent une résistance à plusieurs des drogues, sont vitaux pour l'hygiène hospitalière. Ces mécanismes incluent, pour.

La présence de ces mécanismes est notée dans les rapports de laboratoire et envoyée à l'hôpital. Fig. 1: Principe et exemple de la méthode de diffusion sur disque. Figure 2: Principe de la concentration minimale inhibitrice.




Figure 3: Phénomène d’induction dans la méthode de diffusion sur disque.

Détermination de l'antibiotique dans le sang, l'urine et d'autres liquides organiques de la personne.Dans le trépied, placez deux rangées de tubes. Dans l’un d’eux, des dilutions de l’antibiotique de référence sont préparées, dans l’autre, du liquide à tester. Ensuite, une suspension de bactéries à tester préparées dans du milieu Hiss avec du glucose est ajoutée à chaque tube. Lors de la détermination de la pénicilline, des tétracyclines, de l'érythromycine dans le liquide de test, la souche standard S. aureus est utilisée comme bactérie de test et E. coli est utilisé pour le dosage de la streptomycine. Après incubation des cultures à 37 ° C pendant 18 à 20 h, les résultats de l'expérience sur la turbidité du milieu et sa coloration avec un indicateur dû au fractionnement du glucose par les bactéries à tester sont notés. La concentration de l'antibiotique est déterminée en multipliant la dilution la plus élevée du liquide de test qui retarde la croissance des bactéries à tester par la concentration minimale de l'antibiotique de référence qui retarde la croissance des mêmes bactéries à tester. Par exemple, si la dilution maximale du liquide de test, qui retarde la croissance des bactéries à tester, est de 1: 1024 et que la concentration minimale de l'antibiotique de référence qui retarde la croissance de la même bactérie à tester est de 0,313 µg / ml, le produit correspond à 1024x0,313 = 320 µg / ml antibiotique dans 1 ml.




Les antibiotiques font partie des développements les plus importants en médecine. La pénicilline et de nombreux médicaments ultérieurs provoquent des maladies telles que la syphilis, la pneumonie, les infections de plaies, l'intoxication sanguine ou la scarlatine. En conséquence, l'espérance de vie augmente régulièrement et les infections bactériennes accusent un retard considérable sur les maladies cardiovasculaires et le cancer en tant que cause de décès. Cependant, certaines de ces infections redeviennent un problème de santé. Raison: résistance accrue aux antibiotiques.

Détermination de la capacité de S. aureus à produire de la bêta-lactamase.Dans une fiole contenant 0,5 ml de culture quotidienne en bouillon d'une souche standard de staphylocoque sensible à la pénicilline, ajouter 20 ml d'agar nutritif fondu et refroidi à 45 ° C, mélangé et versé dans une boîte de Pétri. Après durcissement à la gélose, un disque contenant de la pénicilline est placé au centre de la cupule à la surface du support. Les rayons de la culture ensemencée en boucle de disque. Les cultures sont incubées à 37 ° C jusqu'au lendemain, après quoi les résultats de l'expérience sont notés. La capacité des bactéries étudiées à produire de la bêta-lactamase est jugée par la présence de la croissance d’une souche standard de staphylocoque autour de l’une ou l’autre des cultures étudiées (autour du disque).

Trop fréquent et abusé

"Les antibiotiques sont parmi les médicaments les plus largement utilisés pour l'homme, les animaux et l'agriculture", explique Oscar Janata. L'application est vraiment destinée uniquement aux très graves infections bactériennes. "Une gestion trop imprudente et imprudente a conduit à des décennies de prolifération d'agents pathogènes bactériens qui sont devenus moins sensibles, voire totalement résistants aux antibiotiques."

De plus, les antibiotiques ne sont souvent pas pris correctement. Presque tous les patients sur deux arrêtent le traitement trop tôt, bien que les agents pathogènes ne soient pas complètement éliminés. Des facteurs tels que l’arrêt trop précoce du traitement, une posologie trop faible ou une durée de traitement trop longue contribuent finalement à la formation de résistances.



Pour déterminer la sensibilité des microbes aux antibiotiques, il existe un certain nombre de méthodes, parmi lesquelles les plus courantes sont: la méthode des dilutions en série dans un milieu nutritif liquide ou une gélose nutritive, la méthode de diffusion dans la gélose (la méthode des disques saturés d'antibiotiques) et un certain nombre de méthodes accélérées.

La détermination de la sensibilité des microbes aux antibiotiques in vitro est effectuée dans des conditions significativement différentes de celles dans lesquelles le médicament agit dans l'organisme. Ses résultats sont fortement influencés par des facteurs tels que la composition et le pH du milieu nutritif, la taille de la dose, l’âge de la culture, les conditions de culture, etc. Lors de l’utilisation de la méthode de diffusion dans de la gélose, les résultats de la recherche sont influencés par l’épaisseur du milieu nutritif, son humidité, le taux de diffusion des antibiotiques, taux de croissance des micro-organismes étudiés, etc. La méthode de diffusion dans la gélose (méthode du disque de papier) est la plus simple et la plus utilisée, mais elle n’est que qualitative. La méthode des dilutions en série d'antibiotiques dans un milieu nutritif dans des conditions expérimentales standard est une méthode quantitative plus fiable et plus précise.

Méthode de dilution en série

L'indication permettant de déterminer la sensibilité par la méthode de dilution en série est la nécessité d'obtenir des données quantitatives (principalement à cours sévère  processus) pour la réalisation d’une antibiothérapie contrôlée (développement de modes d’administration).

Détermination du degré de sensibilité à la série médicaments antibactériens le microbe responsable du processus infectieux affecte le choix de l'antibiotique (rejet des médicaments caractérisés par une toxicité relativement élevée et une sensibilité modérée de l'agent pathogène à leur égard), sa posologie (la concentration de l'antibiotique dans le sang doit être de 2 à 3 fois son CPM pour l'agent pathogène) et . Une détermination quantitative de la sensibilité est également nécessaire pour déterminer l'action bactéricide d'un médicament sélectionné. effet thérapeutique  et sans rechute) par rapport à cet agent pathogène.

Il existe deux modifications de la méthode - la définition des microbes sensibles aux antibiotiques sur des milieux nutritifs liquides et denses.

La méthode permet de déterminer la concentration minimale de croissance inhibitrice de l'antibiotique (BMD) pour la souche isolée de l'agent pathogène. Il consiste à préparer une série de dilutions en série d'antibiotiques dans un milieu nutritif avec l'introduction d'une concentration de l'antibiotique dans le milieu nutritif à toutes les dilutions de la culture étudiée afin de déterminer la sensibilité microbienne.

"Antibiothérapie rationnelle"
   S.M. Navashin, I.P.Fomina

L'échec de l'antibiothérapie peut aussi être dû à un mauvais choix de doses et de méthodes d'administration du médicament, à un début de traitement tardif, à l'utilisation d'antibiotiques à faible dose avec un traitement d'association, à une durée de traitement insuffisante, etc. sang et tissus, masses nécrotiques, etc. Résultats insatisfaisants du traitement par ...


Les méthodes accélérées de détermination de la sensibilité comprennent la méthode par laquelle la formation de formes bactériennes involutives sous l'action d'un antibiotique est détectée au cours d'une microscopie à contraste de phase. Des formes involutives de micro-organismes se forment en présence de concentrations bactériostatiques de l'antibiotique. En l'absence de celui-ci sous l'action de concentrations sous-bactériostatiques, ainsi que de la résistance de la souche étudiée au médicament, des microcolonies normales se développent. Changements morphologiques des cultures étudiées sous l'influence d'un antibiotique ...


En cas de sensibilité à l'action de l'antibiotique de la souche pathogène, le glucose n'est pas digéré lorsqu'il est cultivé sur un milieu contenant du glucose, du rouge de phénol (à titre d'indicateur) et certaines concentrations de l'antibiotique. Dans cet environnement est peint en couleur pourpre en raison de son alcalinisation. Changer la couleur rouge de l'environnement en jaune indique le fractionnement du glucose avec la formation d'acide à la suite de la croissance d'un…


En Angleterre, la méthode du groove proposée par Flemming est utilisée à ce jour. Pour déterminer la sensibilité des microbes aux antibiotiques, utilisez cette méthode pour découper une bande dans la plaque de gélose afin d'obtenir un sillon, puis testez les souches microbiennes perpendiculairement au sillon. Le sillon est rempli de gélose fondue et refroidie à 35-60 ° C contenant certaines concentrations de l'antibiotique. En raison de la diffusion de l'antibiotique dans le milieu nutritif ...


L’absence d’une zone d’inhibition de la croissance du microbe autour du disque indique que la souche testée est insensible à cet antibiotique; avec une zone d'un diamètre allant jusqu'à 10 mm, la déformation est considérée comme insensible. Les colonies simples ou un film mince de croissance à l'intérieur de la zone d'inhibition de la croissance ne sont pas pris en compte. La taille des zones peut varier en fonction de l'épaisseur de la couche d'agar, de l'épaisseur de la pelouse microbienne, de la composition du milieu. Cependant ...


Pour réduire le nombre de tests, il convient d’utiliser des jeux de disques en tenant compte du type d’agent pathogène et de la localisation de l’infection (voir tableau ci-dessous). Principaux ensembles de disques contenant des antibiotiques, recommandés pour déterminer la sensibilité en fonction du type de culture isolée et du matériel pathologique. Antibiotique contenu dans le disque. Essai préliminaire de sensibilité de la microflore du matériel pathologique. Test de sensibilité de la culture pure de pus dans les expectorations d'urine Staphylococcus ...


Pour contrôler l’exactitude et la normalisation de la recherche dans chaque expérience, il est nécessaire d’utiliser des cultures tests présentant une sensibilité connue aux antibiotiques. L'OMS recommande à cet effet trois cultures de la collection de cultures de type américain: Escherichia coli (ATCC 25922), Staphylococcus aureus (ATCC 25923) et Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853). Pour déterminer la sensibilité d'agents pathogènes isolés, il est nécessaire d'effectuer une analyse de contrôle avec la mesure des zones d'inhibition de la croissance ...


Préparation des coupelles Milieu de gélose fondue (bouillon de Hottinger avec une teneur de 120-140 mg% d'azote aminé - 1000 ml; gélose tafuinsky - 15 g; phosphate de sodium disubstitué - 3 g, pH après stérilisation 7,0—7,2 ) versé dans 20 ml de boîtes de Pétri stériles de 100 mm de diamètre, situées sur une surface horizontale. Avant l'infection, la surface du support congelé est séchée pendant ...


Parmi les deux méthodes permettant de déterminer la sensibilité des microbes aux antibiotiques (dans un milieu liquide et dense), la méthode de la dilution en série dans un milieu liquide est plus précise. Les résultats obtenus en déterminant la sensibilité dans un milieu nutritif solide sont moins constants. La méthode de dilution en gélose ne doit pas être utilisée pour évaluer la sensibilité de microbes produisant une croissance mince et éparse (streptocoques, pneumocoques) ou s'étendant largement sur la surface ...


En fonction de la taille de la dose dans les semences, la valeur de l’antibiotique IPC peut fluctuer: à mesure que la dose augmente, la sensibilité diminue en raison de l’augmentation de la quantité de pénicillinase formée par les staphylocoques dans le milieu. Les tubes sont incubés à 37 ° C pendant 18 à 24 heures. Les résultats sont pris en compte lors de la détermination de la présence ou de l'absence de croissance microbienne dans un milieu contenant différentes dilutions de l'antibiotique. Le dernier tube à essai avec retard de croissance (bouillon clair) ...